Dark septate endophyte merupakan kelompok jamur endofit yang hidup pada akar tanaman tanpa menimbulkan gejala penyakit, serta berpotensi meningkatkatkan ketahanan tanaman terhadap cekaman biotik dan abiotik. Penelitian terkait DSE pada tanaman serai wangi (Cymbopogon nardus) masih terbatas. Penelitian ini bertujuan untuk mengkarakterisasi Dark septate endophyte yang di isolasi dari akar tanaman serai wangi di Desa Kong Bur Kecamatan Blangpegayon kabupaten gayo Lues. Metode yang digunakan adalah metode deskriptif melalui isolasi jamur dari sampel akar serai wangi, pemurnian, pengamatan makroskopis dan mikroskopis, serta uji patogenitas menggunakan biji kacang hijau. Isolasi dilakukan pada media CMA (Cron Milk Agar) dan PDA (Potato Dextrose Agar), diikuti dengan pengamatan ciri koloni dan struktur hifa. Hasil penelitian menunjukkan bahwa dari 12 isolat diperoleh 9 isolat terduga DSE dengan kode isolat CN1, CN2, CN3, CN4, CN5, CN6, CN7, CN8 dan CN9. Berdasarkan karakteristik morfologi,, isolat tersebut dikelompokkan menjadi 4 genus yaitu Cladosporium(CN1), Culvularia (CN4, CN5, CN6 dan CN8), Phialocephala (CN3, CN7), dan Artemisia (CN9). Uji patogenitas menunjukkan sebagia isolat tidak bersifat patogen dan berpotensi sebagai endofit menguntungkan