Akuakultur di Indonesia dilakukan di perairan air tawar, payau dan laut dengan produksi terbatas pada sejumlah spesies ikan seperti ikan nila. Meskipun ikan nila mudah beradaptasi dengan lingkungan akan tetapi dapat terserang infeksi bakteri Aeromonas hydrophila. Salah satu upaya untuk pengobatan terhadap bakteri tersebut adalah dengan menggunakan kitosan yang merupakan turunan kitin yang berpotensi untuk dikembangkan sebagai kandidat antimikroba karena mengandung enzim lisozim dan gugus aminopolisakarida yang dapat menghambat pertumbuhan mikroba. Tujuan dari penelitian ini untuk mengetahui kemampuan aktivitas kitosan limbah cangkang kerang bulu (Anadara antiquata) dalam menghambat Aeromonas hydrophila secara in vitro dan in vivo pada ikan nila. Metode yang digunakan untuk pembuatan kitosan meliputi deproteinasi, demineralisasi, depigmentasi, dan deasetilasi. Pengujian secara invitro dilakukan uji aktivitas antibakteri dengan metode difusi cakram (Tes Kirby-Bauer). Pengujian secara invivo dilakukan dengan metode perendaman. Hasil penelitian menunjukkan rendemen kitosan sebesar 77,2%. Aktivitas antibakteri kitosan terhadap Aeromonas hydrophila konsentrasi yang paling efektif yaitu pada 7% dengan nilai zona hambat sebesar 6,85 mm. Hasil analisis data didapatkan bahwa terdapat signifikan antara perlakuan uji. Adapun Pengujian secara in vivo pada ikan nila didapatkan hasil pesentase kelangsungan tertinggi terdapat pada perlakuan konsentrasi optimal (kitosan 7%) dengan nilai 68.74%. Hasil analisis data didapatkan bahwa tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara perlakuan kosentrasi optimal dan kontrol positif.